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液相色譜儀分析中色譜峰拖尾的原因分析
更新時間：2021-03-26
技術(shù)文章
液相色譜儀分析中色譜峰拖尾的原因有色譜柱被污染、柱外死體積、樣品過載、樣品溶劑過強(qiáng)、組分共流出、流動相pH值在樣品pKa附近和填料表面惰性不好等。
一、色譜柱被污染：
如果色譜柱開始使用時峰形正常，使用一段時間后逐漸出現(xiàn)峰拖尾，則色譜柱被污染的可能性很大。這時需要對色譜柱加強(qiáng)沖洗，即使用比方法流動相更強(qiáng)的溶劑沖洗色譜柱。
建議做好樣品前處理，但如果前處理后依然比較臟，強(qiáng)烈建議配置保護(hù)柱。一旦峰形變差，柱效下降，應(yīng)及時更換保護(hù)柱芯。
二、柱外死體積：
較大的柱外死體積會導(dǎo)致峰形展寬和峰拖尾，建議仔細(xì)檢查樣品經(jīng)過的所有管路和各連接部位，使用合適的管線和接頭。
三、樣品過載：
減小進(jìn)樣體積或稀釋樣品。
四、樣品溶劑過強(qiáng)：
樣品溶劑強(qiáng)度應(yīng)不高于流動相洗脫強(qiáng)度。使用流動相溶解樣品或使用比初始比例流動相洗脫能力更弱的溶劑溶解樣品。
五、組分共流出：
如果一小峰包含在一大峰的后面，需要做好色譜條件的優(yōu)化，有條件時可利用PDAD檢查峰純度。
六、流動相pH值在樣品pKa附近：
流動相pH值在樣品pKa附近時，樣品解離平衡不充分，容易出現(xiàn)前沿峰或拖尾峰，所以流動相pH值應(yīng)盡量選在樣品pKa±1.5以外。
七、填料表面惰性不好：
鍵合硅膠型填料表面的殘留硅羥基或金屬雜質(zhì)易與待測化合物發(fā)生二次作用而導(dǎo)致拖尾。建議：
1、選用高純硅膠合成填料的色譜柱和進(jìn)行了有效硅羥基封端填料的色譜柱。
2、降低流動相pH值，抑制硅羥基解離。
3、流動相中添加減尾劑，如三乙胺。
4、使用不同的有機(jī)溶劑。
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